精准诊断，高效解决： Waters H-Class UPLC 精密度不佳故障排查实录
近日，接到客户的紧急报修，其Waters H-Class UPLC系统在连续进样同一份样品时，出现了主峰精密度差、峰型异常的问题，这直接影响了实验数据的准确性和重现性。面对这一挑战，鲁班工程师迅速响应，展开了一场精准的“诊断”之旅。
故障表现
当连续进样同一份样品时，主要表现为主峰（保留时间约5.1分钟）的峰面积和峰高重复性不佳。
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通过分析发现，两针样品的主峰峰型均存在异常：第一针出现明显拖尾并伴随鼓包，第二针则出现前沿鼓包，提示可能存在系统混合问题或色谱柱状态异常。
初步排查
我们的工程师抵达现场后，首先对系统进行了基础检查：
· FTN进样器功能测试：正常。
· 系统压力稳定性测试：在12000 psi高压下，波动仅为8 psi，表现稳定。
· 使用咖啡因标准品进行精度测试：结果符合仪器OQ标准，初步排除了核心硬件故障。
基于这些结果，我们将焦点转向了方法条件与系统配置。通过与客户深入沟通，解到流动相为超纯水与纯乙腈（初始比例70：30），样品稀释剂为纯乙腈，且样品的稳定性良好。
排查过程
优化溶剂匹配：考虑到样品稀释液为纯乙腈，故将洗针液更换成纯乙腈，与样品稀释剂保持一致，避免交叉污染。同时，调整注射器灌注液为30%乙腈水溶剂，使其与初始流动相匹配，避免因溶剂强度不匹配带来的“溶剂效应”。
确认色谱柱性能：更换了一支全新的、同型号的色谱柱进行对比测试，以确认是否因原色谱柱柱效下降或污染导致的峰型异常。
执行精细维护：在运行样品之前，对注射器执行30次灌注操作，检查并排除气泡，确保整个流路都被液体完全充满，排除气泡对峰型的干扰。
检查连接：对于Waters CHA柱温箱，注意APH接头与色谱柱连接正确，避免死体积导致峰展宽的可能。
结果验证
在满足上述条件下，使用新旧色谱柱各运行样品6针，进行横向对比测试：(左侧为新色谱柱走的样品色谱图，右侧为原色谱柱走的样品色谱图)
峰型改善： 主峰的“鼓包”现象完全消失，峰型变得对称、尖锐。
精密度恢复： 主峰峰面积和峰高的重复性显著提升，达到分析方法要求。
色谱柱性能对比： 新旧色谱柱在主峰面积上接近，但新色谱柱展现出更优异的性能：峰更高、更尖锐，并且能有效分离一个在4.885分钟出峰的、在原色谱柱上未能分开的杂质。这证实了原色谱柱确实存在柱效下降的问题。
经验总结与用户建议
在UPLC方法开发与日常维护中几个不容忽视的细节：
溶剂相容性：关注样品溶剂、洗针液、灌注液与流动相起始组成的匹配，这是避免溶剂效应，获得良好峰型和精密度的基础。
色谱柱柱效： 需定期评估色谱柱柱效，建立色谱柱使用与维护记录。
日常系统维护： 规范的日常维护，如排查气泡、检查管路以及色谱柱连接等，是保障数据长期稳定的基石。
通过鲁班工程师专业、系统的诊断与优化，不仅快速恢复了该用户H-Class UPLC系统的卓越性能，更帮助其深化了对仪器原理的理解，为未来获得持续可靠的分析数据奠定了坚实基础。
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